【简介】

黄曲霉毒素是曲霉菌属的高毒代谢产物，是一种强烈的致癌物；黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢产物，是通过喂食动物带有黄曲霉毒素B1的饲料而分泌到奶中的。

黄曲霉毒素检测标准中检测黄曲霉毒素M1的方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、薄层色谱法（TLC）和酶联免疫吸附测定（ELISA）等。HPLC法灵敏度较高，结果稳定，但所需仪器设备昂贵，样品准备耗时长，不适于大量样品的筛选；TLC法为目测半定量，并且需要大量接触毒素标准品，不利于操作者健康。用此黄曲霉毒素M1 ELISA检测试剂盒可快速、准确地检测出奶及奶粉中的黄曲霉毒素M1的含量是否超出国家标准及国际标准。我国鲜乳中黄曲霉毒素M1限量标准是0.5 μg/kg(500 ppt)。

【黄曲霉毒素M1】

黄曲霉毒素M1属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种，哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食物后，在体内通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。这类毒素在湿热地区食物和饲料中泛起的机率最高。之所以广受正视是由于它是人类癌症的一个重要的致癌源，早已被世界卫生组织（WHO）列为I类致癌物。至今已分离出的黄曲霉毒素及其衍生物有20多种，在自然食品中以黄曲霉毒素B1最为多见，危害性也最强，而此次牛奶检测超标的黄曲霉素M1则是黄曲霉毒素B1的代谢产物。黄曲霉毒素M1检测卡适用于液态奶和奶粉的检测。

黄曲霉毒素检测标准---黄曲霉毒素M1标准储备溶液：分别称取标准品黄曲霉毒素M1 0.10 mg（精确至0.01 mg），用三氯甲烷（4.4）溶解定容至10 mL。此标准溶液浓度为0.01 mg/mL。溶液转移至棕色玻璃瓶中后，在-20 ℃电冰箱内保存，备用。 

黄曲霉毒素检测标准---黄曲霉毒素M1标准系列溶液：吸取黄曲霉毒素M1 标准储备溶液（4.13）10 μL于10 mL容量瓶中，

用氮气将三氯甲烷吹至近干，空白基质溶液（4.12）定容至刻度，所得浓度为10 ng/mL的M1标准中间溶液。再用空白基质溶液（4.12）将黄曲霉毒素M1标准中间溶液稀释为0.5 ng/mL、0.8 ng/mL、1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、4.0 ng/mL、6.0 ng/mL、8.0 ng/mL的系列标准工作液。 

【中毒症状】

黄曲霉毒素是一种强列的肝脏毒，对肝脏有特殊亲和性并有致癌作用。它主要强烈抑制肝脏细胞中RNA的合成，破坏DNA的模板作用，阻止和影响蛋白质、脂肪、线粒体、酶等的合成与代谢，干扰动物的肝功能，导致突变、癌症及肝细胞坏死。同时，饲料中的毒素可以蓄积在动物的肝脏、肾脏和肌肉组织中，人食入后可引起慢性中毒。

中毒症状分为三种类型：

1）急性和亚急性中毒  短时间摄入黄曲霉毒素量较大，迅速造成肝细胞变性、坏死、出血以及胆管增生，在几天或几十天死亡。

2）慢性中毒  持续摄入一定量的黄曲霉毒素，使肝脏出现慢性损伤，生长缓慢、体重减轻，肝功能降低，出现肝硬化。在几周或几十周后死亡。

3）致癌性  实验证明许多动物小剂量反复摄入或大剂量一次摄入皆能引起癌症，主要是肝癌。

【原理 】

试样经过离心、脱脂、过滤，滤液经含有黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体的免疫亲和柱层析净化，黄曲霉毒素M1交联在层析介质中的抗体上。此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一性，当样品通过亲和柱时，抗体选择性的与所有存在的黄曲霉毒素M1(抗原)键合。用甲醇-水(1+9)将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇-水(8+2)通过免疫亲和柱洗脱，将溴溶液衍生后的洗脱液置于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1含量。 

【ELISA检测法的特点】

ELISA 法特别相宜大批样品集中检测，胶体金免疫层析方法适合现场单个或少数样品即时检测。该类方法有以下特点：

1) 敏捷度高: 免疫层析法可检出量可达ng级，ELISA 法最低检出量可达pg级，并可定量测定。

2) 干扰小:抗体抗原的免疫反应特异性很强，结构类似物、荧光物质、有色物质对检测的干扰很小。

3) 操纵简便快捷:因为特异性强，简化了样品的预处理和提取纯化过程，同时操纵步骤也非常简便，测定时间也短。

4) 安全性高，污染少，本钱低廉，不需要昂贵的测定仪器'所用试剂也相对较少，特别是由于敏捷度高毒素标准品的浓度可以很低，减少了对检测职员和环境的潜伏危害和污染。

【黄曲霉毒素检测标准】

品名	中国标准μg/kg（ppb)	美国标准μ g/kg(ppb)	欧盟μ g/kg(ppb)
黄曲霉毒素检测标准---玉米、花生、坚果和干果（核桃、杏仁）	≤ 20	≤ 20	≤2、4、5、8、10 、15
黄曲霉毒素检测标准---玉米及花生仁制品（按原料折算）	≤ 20	≤ 20	≤2、4、5、8、10、
黄曲霉毒素检测标准---大米、其它食用油（香油、菜子油、）	≤10	≤10	≤ 2 、 4
黄曲霉毒素检测标准---其它粮食（麦类、面粉、薯干）、发酵食品（酱油）	≤ 5	≤ 5	不得检出
黄曲霉毒素检测标准---牛乳及其制品	≤0.5	≤0.5	≤ 0.05